Phương pháp nhuộm gram giúp phân biệt giữa hai loại vi khuẩn chính: gram dương và gram âm, dựa trên cấu trúc tế bào của chúng và khả năng bắt màu trong quá trình nhuộm. Trong bài viết sau, Trung tâm sửa chữa điện lạnh – điện tử Limosa sẽ giới thiệu đến bạn các bước nhuộm gram và lưu ý quan trọng khi nhuộm gram.

Trung tâm sửa chữa điện lạnh – điện tử Limosa
Trung tâm sửa chữa điện lạnh – điện tử Limosa

1. Phương pháp nhuộm gram là gì?

  • Nhuộm Gram là một phương pháp chẩn đoán dựa trên đặc tính lý hóa của thành tế bào, được sử dụng để phân loại vi khuẩn thành hai loại chính: vi khuẩn gram âm và vi khuẩn gram dương. Phương pháp này có thể được thực hiện trên cả dịch cơ thể và mẫu sinh thiết từ các vùng nghi ngờ nhiễm khuẩn.
  • Nhuộm Gram đóng vai trò quan trọng trong việc nhanh chóng xác định loại vi khuẩn, giúp chẩn đoán các bệnh nhiễm khuẩn một cách hiệu quả. Phương pháp này mang lại những lợi ích đáng kể, bao gồm khả năng phân biệt giữa các loại vi khuẩn một cách nhanh chóng, từ đó hỗ trợ xác định hướng điều trị cũng như dự báo tiên lượng bệnh.
  • So với phương pháp nuôi cấy, Nhuộm Gram không chỉ tiết kiệm thời gian mà còn giúp tăng cường khả năng xác định loại vi khuẩn trong môi trường nhanh chóng và chính xác. Các thuốc nhuộm được sử dụng trong phương pháp này bao gồm một loạt các chất nhuộm có thể tương tác với thành tế bào của vi khuẩn, tạo nên sự phân biệt giữa vi khuẩn gram âm và gram dương.
Phương pháp nhuộm gram là gì

2. Quy trình các bước nhuộm gram

Quy trình các bước nhuộm gram được thực hiện thông qua các bước cụ thể sau đây:

Bước 1: Chuẩn bị và dàn đều mẫu bệnh phẩm hoặc vi khuẩn lên lam kính sạch để tạo điều kiện thuận lợi cho quá trình nhuộm.

Bước 2: Cố định mẫu bệnh phẩm bằng cách hơ trên ngọn lửa đèn cồn và để mẫu nguội. Bước này giúp mẫu bám chặt lên lam kính.

Bước 3: Phủ dung dịch tím Gentian và để khoảng 30 giây, sau đó rửa nhẹ dưới vòi nước. Mục tiêu của bước này là nhuộm tất cả vi khuẩn thành màu tím.

Bước 4: Phủ dung dịch Lugol để cố định màu trong vòng 30 giây và rửa dưới vòi nước. Dung dịch này giúp gắn màu tím vào vi khuẩn, phân biệt giữa các loại vi khuẩn đậm và nhạt màu.

Bước 5: Tẩy màu bằng cồn acetone trong khoảng 30 giây và rửa nước. Đây là bước quan trọng để phân biệt giữa vi khuẩn đã được cố định màu và những vi khuẩn chưa được nhuộm.

Bước 6: Phủ dung dịch đỏ Fuchsin trong vòng 30 giây và rửa dưới vòi nước. Bước này làm vi khuẩn đã bị tẩy màu tái tạo màu đỏ, trong khi vi khuẩn đã được nhuộm tím không bị ảnh hưởng.

Bước 7: Để mẫu khô tự nhiên và sau đó soi dưới vật kính dầu để quan sát và phân loại vi khuẩn dựa trên màu sắc và đặc tính của chúng.

Quy trình các bước nhuộm gram

3. Cơ chế bắt màu gram của các loại vi khuẩn 

  • Vi khuẩn gram dương: Vi khuẩn có đặc điểm là lớp peptidoglycan dày ở thành tế bào, tạo nên một chất cản trở cho phức hợp tím tinh thể, khiến cho sau khi nhuộm gram sẽ bắt màu tím sẫm Gentian. Đặc biệt, những vi khuẩn này không bị tẩy màu sau khi sử dụng dung dịch cồn tẩy 950. Các vi khuẩn thuộc nhóm này thường được phân loại là vi khuẩn gram dương, ví dụ như tụ cầu, phế cầu, liên cầu,…
  • Vi khuẩn gram âm: Vi khuẩn có lớp peptidoglycan mỏng hơn và có thêm lớp màng lipopolysaccharide bên ngoài, không giữ được phức hợp tím tinh thể-iod, do đó sẽ bị khử màu. Sau đó, khi sử dụng dung dịch Fuchsin, những vi khuẩn này sẽ bắt màu đỏ hoặc hồng. Các vi khuẩn thuộc nhóm này thường được phân loại là vi khuẩn gram âm.

4. Lưu ý về nguyên nhân gây sai lệch kết quả khi nhuộm gram

  • Chất lượng mẫu bệnh phẩm cực kỳ quan trọng. Mẫu nhiễm khuẩn quá mạnh hoặc quá yếu đều có thể dẫn đến kết quả không chính xác.
  • Quá trình nhuộm cần được thực hiện đúng theo quy trình và đúng thời gian để đảm bảo màu sắc đồng đều và chính xác.
  • Bước tẩy màu là một bước quan trọng. Nếu thời gian tẩy màu không đúng hoặc không sử dụng các chất tẩy màu chất lượng, có thể gây sai lệch trong việc phân biệt giữa các loại vi khuẩn.
  • Chất nhuộm phải được lưu trữ đúng cách và kiểm tra chất lượng thường xuyên để đảm bảo độ tinh khiết và hiệu quả trong quá trình sử dụng.
  • Sự chênh lệch trong chất duy trì màu cũng có thể gây ảnh hưởng đáng kể đến kết quả. Chất duy trì màu cần được kiểm soát về chất lượng và sử dụng đúng liều lượng.
  • Môi trường làm việc cũng ảnh hưởng đến kết quả. Việc làm trong điều kiện không sạch sẽ hoặc có nhiễm tạp chất có thể làm giảm độ chính xác của kết quả.
  • Việc kiểm soát chất lượng toàn bộ quá trình, từ chuẩn bị mẫu đến kết quả cuối cùng, là quan trọng để giảm thiểu sai lệch và đảm bảo tính chính xác của phương pháp nhuộm Gram.

Hy vọng rằng thông qua bài viết trên của Trung tâm sửa chữa điện lạnh – điện tử Limosa, bạn có thể nắm được các bước nhuộm gram một cách chi tiết. Phương pháp nhuộm Gram giúp xác định cấu trúc tế bào và giúp hiểu biết về tính chất của vi khuẩn và được áp dụng trong nhiều lĩnh vực khác nhau.

🍀🍀 Quý đọc giả nếu có quan tâm đến một số dịch vụ hữu ích cần cho việc sửa chữa máy pha cafe của mình tại Limosa vui lòng tham khảo tại đây :

👉 Sửa máy pha cafe

👉 Sửa máy xay cà phê

👉 Sửa máy rang cà phê

👉 Sửa máy xay sinh tố

Trung tâm sửa chữa Limosa
Trung tâm sửa chữa Limosa
Đánh Giá
hotline